Внимание! В период с 29.07.22 по 11.08.22 сервис будет находиться в режиме технического обслуживания. В этой связи может наблюдаться нестабильная работа. Приносим извинения за неудобства.
1
Доступно поисковых запросов: 1 из 2
Следующий пробный период начнётся: 17 августа 2022 в 09:01
Снять ограничение

ГОСТ Р 51116-2017

Комбикорма, зерно и продукты его переработки. Определение содержания дезоксиниваленола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Недействующий стандарт
Проверено:  09.08.2022

Информация

Название Комбикорма, зерно и продукты его переработки. Определение содержания дезоксиниваленола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Название английское Сompound feeds, grain and grain by-products. Determination of desoxinivalenol by high-performance liquid chromatography method
Дата актуализации текста 01.01.2021
Дата актуализации описания 01.01.2021
Дата издания 11.10.2017
Дата введения в действие 01.01.2019
Область и условия применения Настоящий стандарт распространяется на зерно, продукты его переработки, комбикорма, кормовые смеси и устанавливает метод определения содержания дезоксиниваленола (далее - ДОН) высокоэффективной жидкостной хроматографией (далее - ВЭЖХ) с очисткой экстракта от примесей с помощью колоночной хроматографии: - с использованием оксида алюминия, активированного угля и катионита в изократическом режиме элюирования; - с использованием активированного угля в градиентном режиме элюирования. Диапазон измерений содержания ДОН от 0,2 до 5,0 млн-1 (мг/кг)
Опубликован Официальное издание. М.: Стандартинформ, 2017 год
Утверждён в Росстандарт
Взамен ГОСТ Р 51116-97ГОСТ без статуса


ГОСТ Р 51116-2017

Группа С19

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

КОМБИКОРМА, ЗЕРНО И ПРОДУКТЫ ЕГО ПЕРЕРАБОТКИ

Определение содержания дезоксиниваленола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Compound feeds, grain and grain by-products. Determination of desoxinivalenol by high-performance liquid chromatography method

ОКС 65.120

Дата введения 2019-01-01

Предисловие

1 РАЗРАБОТАН Акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт комбикормовой промышленности" (АО "ВНИИКП"), Обществом с ограниченной ответственностью "ЛЮМЭКС-МАРКЕТИНГ" (ООО "ЛЮМЭКС-МАРКЕТИНГ")

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 004 "Комбикорма, белково-витаминно-минеральные концентраты, премиксы"

3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 15 сентября 2017 г. N 1132-ст

4 ВЗАМЕН ГОСТ Р 51116-97


Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона от 29 июня 2015 г. N 162-ФЗ "О стандартизации в Российской Федерации". Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

     1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на зерно, продукты его переработки, комбикорма, кормовые смеси и устанавливает метод определения содержания дезоксиниваленола (далее - ДОН) высокоэффективной жидкостной хроматографией (далее - ВЭЖХ) с очисткой экстракта от примесей с помощью колоночной хроматографии:

- с использованием оксида алюминия, активированного угля и катионита в изократическом режиме элюирования;

- с использованием активированного угля в градиентном режиме элюирования.

Диапазон измерений содержания ДОН от 0,2 до 5,0 млн (мг/кг).

     2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.4.009 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание.

ГОСТ 12.4.021 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 4204 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4461 Реактивы. Кислота азотная. Технические условия

ГОСТ 5556 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия

ГОСТ ISO 6497 Корма. Отбор проб

ГОСТ ISO 6498 Корма, комбикорма. Подготовка проб для испытаний

ГОСТ 6709 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 6995 Реактивы. Метанол-яд. Технические условия

ГОСТ 9293 (ИСО 2435-73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 13496.0 Комбикорма, комбикормовое сырье. Методы отбора проб

ГОСТ 16317 Приборы холодильные электрические бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 20298 Смолы ионообменные. Катиониты. Технические условия

ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28311 Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ Р 12.1.019 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 53228 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.

     3 Сущность метода

Сущность метода заключается в экстракции ДОН из анализируемой пробы смесью ацетонитрила с водой, очистке экстракта с помощью колоночной хроматографии и определении ДОН с использованием обращенно-фазовой ВЭЖХ с фотометрическим детектированием.

     4 Требования безопасности

4.1 При выполнении испытаний необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроприборами по ГОСТ Р 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на используемые приборы.

4.2 Работа с химическими реактивами должна проводиться в вытяжном шкафу.

4.3 Помещение должно быть оснащено вентиляционными системами по ГОСТ 12.4.021, средствами пожаротушения по ГОСТ 12.4.009 и соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004.

4.4. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать допустимых значений по ГОСТ 12.1.005.

4.5 ДОН обладает токсическим действием, поэтому необходимо избегать контакта кожных покровов с его растворами. При попадании раствора на кожу или на стол необходимо смыть загрязнение проточной водой с моющим средством, а затем обработать участок кожи и загрязненные поверхности этиловым спиртом.

     5 Требования к проведению испытаний

5.1 Условия проведения испытаний

При подготовке и проведении испытаний должны быть соблюдены следующие условия:

- температура окружающей среды

от 15°С до 25°С;

- относительная влажность воздуха

не более 80%;

- атмосферное давление

от 84,0 до 106,7 кПа;

- напряжение в сети

от 198 до 242 В;

- частота в сети

от 49 до 51 Гц.

5.2 Требования к квалификации оператора

К выполнению испытаний и обработке их результатов допускают специалиста, имеющего высшее или среднее специальное образование и опыт работы в химической лаборатории, прошедшего соответствующий инструктаж, освоившего метод в процессе обучения и показавшего удовлетворительные результаты при выполнении процедур контроля качества результатов измерений.

     6 Отбор проб

Отбор проб - по ГОСТ ISO 6497, ГОСТ 13496.0 или в соответствии с нормативными документами на анализируемые продукты.

     7 Подготовка проб

Подготовка проб к испытанию - по ГОСТ ISO 6498.

     8 Определение содержания ДОН в изократическом режиме элюирования

8.1 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

8.1.1 Хроматограф жидкостный со спектрофотометрическим детектором, позволяющим проводить измерения в диапазоне длин волн от 200 до 300 нм, снабженный программным обеспечением для сбора и обработки хроматографических данных.

8.1.2 Хроматографическая колонка для ВЭЖХ, заполненная обращенно-фазовым сорбентом, которая обеспечивает в условиях выполнения анализа эффективность не менее 5000 теоретических тарелок по пику ДОН. Для увеличения срока использования колонки рекомендуется использовать защитную колонку (предколонку), заполненную тем же сорбентом.

________________

Примером подходящей колонки является колонка длиной 150 мм и внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная сорбентом Alltima С18 или Kromasil С18 с размером частиц 5 мкм. Эта информация приведена для удобства пользователей стандарта и не является рекламой. Могут быть использованы колонки других типоразмеров и (или) с иным размером частиц, если они обеспечивают указанные требования по эффективности.

8.1.3 Весы неавтоматического действия по ГОСТ Р 53228 с пределами допускаемой погрешности взвешивания ±0,001 г.

8.1.4 Колбы мерные 2(2а)-25(50, 100, 500)-2 по ГОСТ 1770-74 (подраздел 1.3).

8.1.5 Цилиндры мерные 1(2, 3, 4)-10(25, 50, 100, 250)-2 по ГОСТ 1770-74 (подраздел 1.1).

8.1.6 Пипетки градуированные 1(2, 3, 5)-1(1а, 2, 2а)-2-0,5(1, 2, 5, 10) по ГОСТ 29227-91 (раздел 5).

8.1.7 Дозатор пипеточный одноканальный переменного объема 100-1000 мм с метрологическими характеристиками по ГОСТ 28311.

8.1.8 Стандартный образец состава раствора ДОН в ацетонитриле (массовая концентрация ДОН - 100 мкг/см, погрешность не более ±5,0 мкг/см) или ДОН кристаллический с массовой долей основного вещества не менее 97%.

8.1.9 Колонка хроматографическая стеклянная (внутренний диаметр 10 мм, длина 20 см).

8.1.10 Колонка хроматографическая стеклянная (внутренний диаметр 5 мм, длина 10 см) с оттянутым концом и шарообразной верхней частью вместимостью 10-15 см или пластиковые колонки (внутренний диаметр 5 мм).

8.1.11 Испаритель ротационный, снабженный водяной баней с регулятором температуры в диапазоне от 20°С до 90°С.

8.1.12 Насос лабораторный вакуумный, мембранный или водоструйный по ГОСТ 25336, обеспечивающий разрежение от 2,5 до 10 кПа.

8.1.13 Устройство для перемешивания проб (шейкер), обеспечивающее частоту встряхивания до 120 мин.

8.1.14 Шкаф сушильный, обеспечивающий температуру до 200°С.

8.1.15 Измельчитель проб, обеспечивающий измельчение до частиц размером менее 1 мм, например лабораторная мельница.

8.1.16 Холодильник бытовой по ГОСТ 16317.

8.1.17 Колбы П-1-25(50)-14/23, П-2-100-34 или П-1-100-19-26(29-32) по ГОСТ 25336 с притертыми стеклянными или полиэтиленовыми пробками.

8.1.18 Воронки В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.

8.1.19 Стаканы В-1(2)-50 ТХС по ГОСТ 25336.

8.1.20 Фильтры бумажные "красная лента".

8.1.21 Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.

8.1.22 Штатив лабораторный универсальный.

8.1.23 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

8.1.24 Ацетонитрил для ВЭЖХ, ос.ч. (оптическая плотность при 200 нм относительно дистиллированной воды должна быть не более 0,05, массовая доля воды не более 0,05%).

8.1.25 Алюминия оксид для хроматографии нейтральный, фракция 50-150 мкм.

8.1.26 Катионит КУ-2-8 в Н-форме по ГОСТ 20298.

Примечание - Если в спецификации катионита не указана его форма, то перед началом работы необходимо перевести его в Н-форму в соответствии с приложением А.

8.1.27 Уголь активированный с размером частиц от 0,08 до 0,10 мм.

8.1.28 Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч. или азотная по ГОСТ 4461, х.ч.

Примечание - Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками не хуже вышеуказанных, вспомогательного оборудования и материалов с техническими характеристиками не хуже вышеуказанных и реактивов аналогичной или более высокой квалификации.

8.2 Подготовка стеклянной лабораторной посуды

8.2.1 Лабораторную посуду для приготовления и хранения элюента моют серной или азотной кислотой (см. 8.1.28) без применения других моющих средств, тщательно промывают водопроводной и многократно ополаскивают дистиллированной водой (см. 8.1.23) и сушат при температуре 105°С. Категорически запрещается использовать для мытья посуды хромовую смесь.

8.2.2 Остальную стеклянную посуду моют горячей водой с моющим средством, тщательно ополаскивают дистиллированной водой (см. 8.1.23) и также сушат при температуре 105°С.

8.3 Подготовка сорбента для колоночной хроматографии

В чистый химический стаканчик (см. 8.1.19) помещают 10,0 г оксида алюминия и 0,5 г активированного угля (см. 8.1.27), тщательно перемешивают при помощи стеклянной палочки.

Сорбент хранят в стеклянной посуде с пришлифованной или полиэтиленовой пробкой. Срок хранения - 1 мес при комнатной температуре.

8.4 Приготовление растворов

8.4.1 Подвижная фаза для хроматографии

8.4.1.1 Общие требования

Подвижную фазу перед использованием дегазируют выдерживанием в течение 1-2 ч на ультразвуковой бане или с помощью вакуумного насоса.

Подвижную фазу хранят в герметично закрытой посуде. Срок хранения - 7 сут при комнатной температуре.

Для приготовления и хранения подвижной фазы не допускается использование посуды с резиновыми и корковыми пробками.

8.4.1.2 Приготовление подвижной фазы

В мерную колбу (см. 8.1.4) вместимостью 100 см при помощи градуированной пипетки (см. 8.1.6) помещают 6 см ацетонитрила, объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой (см. 8.1.23) и тщательно перемешивают.

8.4.2 Приготовление смеси ацетонитрил - вода в соотношении 84:16 по объему для экстракции ДОН из пробы

В мерную колбу (см. 8.1.4) вместимостью 500 см помещают 420 см ацетонитрила (см. 8.1.24), объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой (см. 8.1.23) и тщательно перемешивают.

Срок хранения смеси в герметично закрытой посуде - 1 мес при комнатной температуре.

8.4.3 Приготовление растворов ДОН

8.4.3.1 Общие требования

Растворы ДОН хранят в холодильнике при температуре от 2°С до 8°С в герметично закрытой посуде, исключающей возможность испарения растворителя и контакт раствора с материалами, отличными от стекла или фторопласта.

Допускается приготовление градуировочных растворов в меньших объемах (в виалах) с использованием пипеточных дозаторов (см. 8.1.7) и использование градуировочных растворов с иными значениями массовой концентрации в диапазоне линейности градуировочной характеристики от 0,4 до 10,0 мкг/см.

8.4.3.2 Приготовление запасного раствора ДОН

В мерную колбу (см. 8.1.4) вместимостью 25 см помещают 1 см раствора стандартного образца состава раствора ДОН в ацетонитриле (см. 8.1.8) и доводят до метки ацетонитрилом (см. 8.1.24).

Номинальное значение массовой концентрации ДОН в запасном растворе составляет 4 мкг/см.

Если значение массовой концентрации ДОН, приведенное в паспорте на стандартный образец, отличается от номинального значения 100 мкг/см или для приготовления запасного раствора ДОН отбирается менее 1 см стандартного образца, то фактическое значение массовой концентрации ДОН в приготовленном растворе , мкг/см, вычисляют по формуле

,                                                             (1)


где - значение массовой концентрации ДОН в растворе стандартного образца, использованном для приготовления запасного раствора, мкг/см;

- объем стандартного образца, отобранный для разбавления, см;

- объем приготовленного раствора, см (25 см).

Срок хранения запасного раствора - 6 мес.

Примечание - Допускается приготовление запасного раствора ДОН с использованием основного раствора, приготовленного по 9.3.2.2.

8.4.3.3 Приготовление градуировочных растворов ДОН

В колбу для упаривания помещают указанный в таблице 1 объем раствора ДОН с номинальным значением массовой концентрации 4 мкг/см (см. 8.4.3.2), удаляют растворитель упариванием в вакууме при температуре водяной бани от 40°С до 45°С. Полученный сухой остаток растворяют в соответствующем объеме (см. таблицу 1) подвижной фазы (см. 8.4.1.2).


Таблица 1

Номер градуировочного раствора

Номинальное значение массовой концентрации ДОН, мкг/см

Объем запасного раствора ДОН (см. 8.4.3.2), , см

Объем подвижной фазы, добавляемый к сухому остатку, см

1

10

2,5

1

2

4

1

1

3

0,4

1

10


Срок хранения градуировочных растворов N 1 и N 2 - 7 сут, раствора N 3 - 1 сут в условиях, исключающих испарение растворителя.

Фактическое значение массовой концентрации ДОН в градуировочных растворах вычисляют по формуле

,                                                              (2)


где - фактическое значение массовой концентрации ДОН в запасном растворе, вычисленное по формуле (1), мкг/см;

- объем запасного раствора, отобранный для разбавления, см;

- объем приготовленного градуировочного раствора, см.

8.4.3.4 Приготовление контрольного раствора ДОН

Контрольный раствор ДОН в подвижной фазе готовят согласно 8.4.3.3, используя аликвоту 0,5 см запасного раствора ДОН номинального значения массовой концентрации 4 мкг/см (см. 8.4.3.2) и растворяя остаток после упаривания в 2 см подвижной фазы (см. 8.4.1.2).

Номинальное значение массовой концентрации ДОН в контрольном растворе составляет - 1 мкг/см, фактическое значение вычисляют по формуле (2).

Срок хранения раствора - 7 сут в условиях, исключающих испарение растворителя.

8.5 Подготовка хроматографа к работе

Подготовку хроматографа к работе проводят в соответствии с руководством по эксплуатации. Необходимые настройки программного обеспечения производят в соответствии с руководством пользователя программного обеспечения.

8.6 Условия проведения хроматографического анализа

При использовании хроматографической колонки по 8.1.2 рекомендуются следующие условия хроматографического анализа:

- подвижная фаза - смесь ацетонитрил - вода (см. 8.4.1.2);

- рабочая длина волны - 210 нм;

- объемная скорость потока подвижной фазы - 150 мм/мин;

- объем дозирования - 20 мм;

- температура термостата колонки (при его наличии) - (25±1)°С.

При использовании колонок других типоразмеров скорость потока подвижной фазы и объем дозирования выбирают в соответствии с указаниями изготовителя хроматографа и колонки.

Допускается варьирование объемной доли ацетонитрила в составе подвижной фазы в диапазоне от 4% до 8% с целью оптимизации разделения пиков ДОН и компонентов матрицы пробы.

8.7 Градуировка хроматографа

Градуировку хроматографа рекомендуется проводить с использованием подвижной фазы (см. 8.4.1.2).

Регистрируют не менее двух хроматограмм для каждого градуировочного раствора (см. 8.4.3.3), проверяют правильность автоматической разметки и, если необходимо, корректируют ее.

Далее проводят процедуру градуировки согласно руководству пользователя программного обеспечения, определяют время удерживания и параметры градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику признают приемлемой, если вычисляемые программой относительное среднеквадратическое отклонение составляет не более 5%, а коэффициент корреляции - не ниже 0,99.

Если хотя бы одно из этих условий не выполняется, заново регистрируют хроматограммы градуировочных растворов и определяют параметры градуировочной характеристики. При этом допускается отбраковывать неудовлетворительные данные, однако число принятых в градуировку точек должно быть не меньше двух для каждого градуировочного раствора.

Повторную градуировку хроматографа проводят при неудовлетворительных результатах ее контроля стабильности (см. 8.8), а также после проведения ремонта или длительного простоя хроматографа.

8.8 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале рабочего дня перед измерениями.

Закупки не найдены
Свободные
Р
Заблокированные
Р
Роль в компании Пользователь

Для продолжения необходимо войти в систему

После входа Вам также будет доступно:
  • Автоматическая проверка недействующих стандартов в закупке
  • Создание шаблона поиска
  • Добавление закупок в Избранное