1
Доступно поисковых запросов: 1 из 2
Следующий пробный период начнётся: 10 октября 2022 в 04:12
Снять ограничение

ГОСТ ISO 14502-2-2015

Чай. Метод определения содержания катехинов
Действующий стандарт
Проверено:  02.10.2022

Информация

Название Чай. Метод определения содержания катехинов
Название английское Tea. Determination of catechins
Дата актуализации текста 01.01.2021
Дата актуализации описания 01.01.2021
Дата издания 24.02.2016
Дата введения в действие 01.01.2017
Область и условия применения Настоящий стандарт устанавливает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для определения (измерения) общего содержания катехинов в чае, исходя из суммы индивидуальных катехинов. Настоящий стандарт распространяется на листовой и растворимый зеленый чай и на черный чай (см. приложение А). Метод может быть также применен для определения галловой кислоты и кофеина, а также теогаллина и теафлавинов
Опубликован Официальное издание. М.: Стандартинформ, 2016 год
Утверждён в Росстандарт

     
ГОСТ ISO 14502-2-2015

     

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ЧАЙ

Метод определения содержания катехинов

Tea. Determination of catechins

МКС 67.140.10

Дата введения 2017-01-01

     

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Некоммерческой организацией "Российская Ассоциация производителей чая и кофе "РОСЧАЙКОФЕ" (Ассоциация "РОСЧАЙКОФЕ") на основе официального перевода на русский язык англоязычной версии указанного в пункте 5 стандарта, который выполнен ФГУП "СТАНДАРТИНФОРМ"

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 октября 2015 г. N 81-П)

За принятие голосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Россия

RU

Росстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 13 ноября 2015 г. N 1811-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 14502-2-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 14502-2:2005* "Определение характеристик субстанций зеленого и черного чая. Часть 2. Общее содержание катехинов в зеленом чае. Метод с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии" ("Determination of substances characteristic of green and black tea - Part 2: Content of catechins in green tea - Method using high-performance liquid chromatography", IDT).

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.


Международный стандарт разработан подкомитетом ISO TC 34/SC 8 "Чай" Технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты" Международной организации по стандартизации (ISO).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с общепринятой терминологией и ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ


Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для определения (измерения) общего содержания катехинов в чае, исходя из суммы индивидуальных катехинов. Настоящий стандарт распространяется на листовой и растворимый зеленый чай и на черный чай (см. приложение А).

Метод может быть также применен для определения галловой кислоты и кофеина, а также теогаллина и теафлавинов.

     2 Нормативные ссылки

Следующие ссылочные нормативные документы* являются обязательными при применении настоящего документа. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного документа, для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного документа (включая все его изменения).

_______________

* Таблицу соответствия национальных стандартов международным см. по ссылке. - Примечание изготовителя базы данных.     


ISO 1572 Tea - Preparation of ground sample of known dry matter content (Чай. Приготовление измельченной пробы с известным содержанием сухих веществ)

ISO 3696:1987 Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)

ISO 7513 Instant tea in solid form - Determination of moisture content (loss in mass at 103°C) [Чай быстрорастворимый в твердой форме. Определение содержания влаги (потеря массы при 103°С)]

     3 Сущность метода

Катехины экстрагируют из измельченной пробы листового чая 70%-ным раствором метанола при температуре 70°C. Пробу растворимого чая растворяют в горячей воде с добавлением раствора ацетонитрила объемной долей 10% для стабилизации экстракта. Индивидуальные катехины в экстракте определяют методом ВЭЖХ на колонке с фенильным сорбентом, используя градиентное элюирование с ультрафиолетовым детектированием при длине волны 278 нм. Для количественного определения используют метод внешнего стандарта. Стандартные образцы катехинов установленной чистоты и с известным содержанием влаги можно использовать без дополнительной подготовки. Как альтернатива, в качестве внешнего стандарта может применяться кофеин с учетом значений коэффициентов относительной чувствительности (RRF) индивидуальных катехинов, установленных международным межлабораторным испытанием ISO.

     4 Реактивы

Используют реактивы только известной степени чистоты.

4.1 Вода, 1-й степени чистоты по ISO 3696.

4.2 Ацетонитрил класса для ВЭЖХ.

4.3 Метанол.

4.4 Кислота уксусная ледяная, класса для ВЭЖХ.

4.5 Метанол, водный раствор для экстракции объемной долей 70%

Вносят 700 см метанола (см. 4.3) в мерную колбу вместимостью 1 дм с одной меткой, доливают водой до метки (см. 4.1) и перемешивают.

4.6 Раствор ЭДТА, массовой концентрации 10 мг/см

(1,00±0,01) г ЭДТА (двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, дигидрат) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см с одной меткой, доливают примерно до половины колбы теплой водой. Перемешивают до полного растворения ЭДТА, охлаждают раствор до комнатной температуры, добавляют воду до метки и перемешивают.

Приготовленный раствор используют в течение одного дня.

4.7 Раствор аскорбиновой кислоты, массовой концентрации 10 мг/см

(1,00±0,01) г L-аскорбиновой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 см с одной меткой, доливают примерно до половины колбы водой. Перемешивают до полного растворения аскорбиновой кислоты, добавляют воду до метки и перемешивают.

Приготовленный раствор используют в течение одного дня.

4.8 Стабилизирующий раствор, состоящий из ацетонитрила объемной долей 10%, раствора ЭДТА массовой концентрации 500 мкг/см и аскорбиновой кислоты массовой концентрации 500 мкг/см

Используя пипетку, переносят 25 см раствора ЭДТА (см. 4.6), 25 см раствора аскорбиновой кислоты (см. 4.7) и 50 см ацетонитрила (см. 4.2) в мерную колбу вместимостью 500 см с одной меткой, доливают воду до метки и перемешивают.

Приготовленный раствор используют в течение одного дня.

4.9 Подвижные фазы

Меры предосторожности - Следует использовать средства защиты глаз, перчатки и готовить реактивы в вытяжном шкафу.
     


    4.9.1 Подвижная фаза А, состоящая из ацетонитрила объемной долей 9%, уксусной кислоты объемной долей 2%, раствора ЭДТА массовой концентрации 20 мкг/см

180 см ацетонитрила (см. 4.2) и 40 см уксусной кислоты (см. 4.4) переносят в мерную колбу вместимостью 2 дм с одной меткой, доливают до половины колбы воду и добавляют 4,0 см раствора ЭДТА (см. 4.6). Доводят водой до метки, перемешивают и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм (см. 5.10).

4.9.2 Подвижная фаза В, состоящая из ацетонитрила объемной долей 80%, уксусной кислоты объемной долей 2%, раствора ЭДТА массовой концентрации 20 мкг/см

800 см ацетонитрила (см. 4.2) и 20 см уксусной кислоты (см. 4.4) переносят в мерную колбу вместимостью 1 дм с одной меткой, доливают примерно 100 см воды, добавляют 2,0 см раствора ЭДТА (см. 4.6). Добавляют воду до метки, перемешивают и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм (см. 5.10).

4.10 Исходные стандартные растворы
     


    4.10.1 Общие положения

Если имеются в наличии катехины известной чистоты, их можно использовать непосредственно в качестве внешних стандартов. Помимо установленной чистоты класса "для ВЭЖХ", важно, чтобы содержание влаги было также известно, поскольку высокие уровни содержания кристаллизационной воды не будут учтены при хроматографическом измерении. Данные о чистоте и содержании влаги в стандартных образцах, используемых в межлабораторном испытании, приведены в приложении В. Если отсутствуют полные данные о чистоте или они не могут быть определены, то содержащие катехин реагенты следует использовать только в качестве маркерных смесей в целях идентификации. В этих случаях количественный состав может быть установлен с использованием внешних стандартов кофеина в сочетании со значениями RRF индивидуальных катехинов (относительно кофеина), полученными в межлабораторных испытаниях (см. 9.3 и [3]).

4.10.2 Кофеин, исходный стандартный раствор массовой концентрации 2,00 мг/см

(0,200±0,001) г безводного кофеина помещают в мерную колбу вместимостью 100 см с одной меткой. Добавляют теплую воду до половины объема колбы. Перемешивают до полного растворения кофеина, охлаждают до комнатной температуры. Доводят до метки водой и перемешивают.

4.10.3 Галловая кислота, исходный стандартный раствор массовой концентрации приблизительно 1,00 мг/см

(0,110±0,001) г моногидрата галловой кислоты (М=188,14) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см с одной меткой, доливают примерно до половины колбы водой. Перемешивают до полного растворения галловой кислоты, добавляют воду до метки и перемешивают.

Приготовленный раствор используют в течение одного дня.

Примечание - Предпочтительным является использование моногидрата галловой кислоты, вследствие его меньшей гигроскопичности, большей растворимости и наличия реактивов аттестованных классов чистоты, например класса ACS, который используют для обозначения реактивов, которые удовлетворяют требованиям, установленным Американским химическим обществом (American Chemical Society - ACS). Если содержание массовой доли воды в исходном реагенте неизвестно, оно должно быть определено по потере массы при температуре 103°С с использованием части реагента.

4.10.4 Приготовление индивидуальных исходных стандартных растворов катехинов

Стандартные образцы катехинов помещают в количествах, приведенных в таблице 1, в отдельные мерные колбы с одной меткой. Растворяют в стабилизирующем растворе (см. 4.8), осторожно нагревая при необходимости (максимально до температуры 40°С). Охлаждают до комнатной температуры, добавляют стабилизирующий раствор до метки и перемешивают.


Таблица 1 - Исходные стандартные растворы катехинов

Компонент раствора

Масса стандартного образца, г

Объем стабилизирующего раствора, см

Номинальная концентрация стандартного раствора, мг/см

(+)-Катехин (С)

0,020±0,001

20

1,0

(-)-Эпикатехин (ЕС)

0,020±0,001

20

1,0

(-)-Эпигаллокатехин (EGC)

0,040±0,001

20

2,0

(-)-Галлат эпигаллокатехина (EGCG)

0,040±0,001

20

2,0

(-)-Галлат эпикатехина (ECG)

0,040±0,001

20

2,0


Если имеется достаточное количество катехинов (т.е. более 20 мг), то для приготовления индивидуальных исходных растворов требуются аналитические весы с точностью взвешивания не менее 0,1 мг. Если количество катехинов недостаточно (т.е. менее 20 мг), требуются аналитические весы с точностью взвешивания не менее 0,01 мг.

4.11 Градуировочные растворы
     


    4.11.1 Раствор галловой кислоты массовой концентрации примерно 200 мкг/см

Используя пипетку, переносят 20 см исходного раствора галловой кислоты (см. 4.10.3) в мерную колбу вместимостью 100 см с одной меткой. Добавляют стабилизирующий раствор (см. 4.8) до метки и перемешивают.

4.11.2 Смешанные градуировочные растворы

Готовят три смешанных градуировочных раствора А, В и С, содержащих кофеин, галловую кислоту и катехины, которые используют в качестве внешних стандартов или маркеров. С помощью пипеток переносят исходный раствор кофеина (см. 4.10.2), градуировочный раствор галловой кислоты (см. 4.11.1) и исходные растворы индивидуальных катехинов (см. 4.10.4) в объемах, указанных в таблице 2, в три отдельные мерные колбы вместимостью 20 см с одной меткой. Добавляют стабилизирующий раствор (см. 4.8) до метки и перемешивают. С помощью пипетки переносят по 1,0 см смешанного градуировочного раствора в маркированные флаконы, изготовленные из темного стекла. Осторожно продувают азотом, закрывают и хранят замороженными при температуре минус 20°С. Номинальные концентрации компонентов эталонных растворов А, В и С приведены в таблице 3.


Таблица 2 - Приготовление смешанных градуировочных растворов

Компонент раствора

Раствор

Объем, требуемый для приготовления 20 см смешанного градуировочного раствора, см

А

В

С

Кофеин

Исходный раствор кофеина концентрацией 2,00 мг/см (см. 4.10.2)

0,5

1,0

1,5

Галловая кислота

Разбавленный раствор галловой кислоты концентрацией 200 мкг/см (см. 4.11.1)

0,5

1,0

2,5

+С

Исходный раствор +С концентрацией 1,0 мг/см (см. 4.10.4)

1,0

2,0

3,0

ЕС

Исходный раствор ЕС концентрацией 1,0 мг/см (см. 4.10.4)

1,0

2,0

3,0

EGC

Исходный раствор EGC концентрацией 2,0 мг/см (см. 4.10.4)

1,0

2,0

3,0

EGCG

Исходный раствор EGCG концентрацией 2,0 мг/см (см. 4.10.4)

1,0

2,0

4,0

ECG

Исходный раствор ECG концентрацией 2,0 мг/см (см. 4.10.4)

0,5

1,0

2,0



Таблица 3 - Номинальные концентрации смешанных градуировочных растворов

Закупки не найдены
Свободные
Р
Заблокированные
Р
Роль в компании Пользователь

Для продолжения необходимо войти в систему

После входа Вам также будет доступно:
  • Автоматическая проверка недействующих стандартов в закупке
  • Создание шаблона поиска
  • Добавление закупок в Избранное